01贴壁细胞培养 ，细胞不贴壁
可能原因：胰卵白酶消化太过；支原体污染；培养基pH值过碱（NaHCO3剖析）；细胞老化；接种细胞起始浓度太低或太高。
解决要领：缩短胰卵白酶消化时间或降低胰卵白酶浓度；疏散培养物 ，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发明支原体污染 ，抛弃培养物；使用无菌醋酸溶液调解pH值或充入无菌CO2；启用新的保种细胞；调理最佳接种细胞浓度。
02悬浮细胞成簇
可能原因：培养液中含钙,镁离子；支原体污染；卵白酶太过消化使得细胞裂解；DNA污染。
解决要领：用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞 ，轻巧吹吸细胞获得单细胞悬液；疏散培养物 ，检测支原体；DNasel处理细胞。
03培养细胞生长缓慢
可能原因：由于更换差别培养液或血清；培养液中一些细胞生长必须身分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂生存不当；接种细胞起始浓度太低；细胞已老化；支原体污染。
解决要领：比较新培养液与原培养液身分 ，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验 ，让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配置培养液 ，或补加谷氨酰胺及生长因子；用无抗生素培养液培养 ，如发明污染 ，抛弃培养物；血清需生保存-10到-20℃。培养液需在2-8℃避光生存。含血清完全培养液在2-8℃生存 ，需在1周内用完；增加接种细胞起始浓度；换用新的保种细胞；疏散培养物 ，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发明支原体污染 ，抛弃培养物。
04培养细胞生长欠好
可能原因：
? 细胞自己的状态
细胞传代次数多 ，细胞老化；
细胞的接种量：接种量过低 ，细胞生长缓慢；
细胞传代时间过晚：细胞中毒 ，影响传代后的细胞生长；
胰酶消化时间过长或过短：时间过长 ，细胞死亡；时间过短 ，细胞未完全疏散而成团 ，细胞死亡；
细胞的冻存与苏醒：慢冻速溶。
? 污染
支原体污染；
霉菌污染。
? 培养基或血清
更换血清或培养基之前未进行验证；
选择的培养基是否合适；
培养基配制是否合适；
培养基配制是否准确无误。
? 培养情况
CO2供应是否正常；
培养箱或摇床温度控制是否正确。
解决要领：凭据以上四个方面的可能原因 ，做出针对性的解决计划
? 注意细胞的自己状态：如传代次数 ，接种量等：
? 制止爆发污染（用正规 ，正当 ，可朔源的血清）；
? 要用合适的血清或培养基 ，最好经过验证；
? 注意实验室的情况。
05培养细胞死亡
可能原因：培养箱内无CO2；培养箱内温度波动太大；细胞冻存或苏醒历程中损伤；培养液渗透压不正确；培养液中有毒代谢产品聚集。
解决要领：检测培养箱内CO2；检查培养箱内温度；取新的生存细胞种；检测培养液渗透压；换入新鲜培养液。
