实验质料：
基础培养基（液体或干粉） PET/PETG方形试剂瓶[NEST]
血清（通例为FBS/NBS） 增补剂
移液枪 电动移液枪
15mL、50mL无菌离心管[NEST] 灭菌超纯水
盒装无菌吸头[NEST] 血清移液管[NEST]
超净事情台 双抗（青链霉素混淆液）
杯式滤器(0.22μm PES膜) [NEST] 针式滤器 (0.22μm PES膜) [NEST]
实验准备：
血清准备：
配置培养基前一天 ，将所需血清从-20℃冰库取出 ，安排入2-8℃冰箱缓慢解冻贮存 ，使用前37℃水浴加热。
培养基准备：
液体基础培养基使用前37℃水浴加热。
实验流程：
基础培养基配置（干粉）：
凭据配置体积 ，选择合适的灭菌后容器 ，在容器中倒入约90%体积的超纯水 ，将培养基干粉全部倒入该容器中 ，用少量超纯水将袋内残留粉末洗出。
搅拌30min使所有身分完全溶解 ，待溶液澄清后 ，凭据说明书加入适当量的碳酸氢钠（剖析纯） ，继续搅拌5-10min至溶解 ，随后超纯水定容并调理PH值。(过滤会使培养基PH值稍微偏高 ，所以用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调解PH值至7.20-7.30）
使用0.22μm杯式滤器[NEST]或0.22μm针式滤器[NEST]过滤除菌 ，并凭据日常使用规格分装入PET/PETG方形试剂瓶[NEST]中 ，2-8℃条件下避光生存备用。【菌检及格后方可使用】
培养基配置：
若含有增补剂 ，用1000μL无菌吸头[NEST]取出适量预热完成的基础培养基 ，注入增补剂西林瓶中 ，将其充分溶解 ，再将含有增补剂的培养基转移入基础培养基中。
接着凭据血清使用比例 ，用血清移液管[NEST]吸取适量预热完成的血清 ，注入基础培养基中 ，盖上瓶盖充分混匀。
双抗加入：
除了特殊筛选系统外 ，一般正常培养状态下 ，培养基中不添加任何抗生素。若为避免细菌、真菌污染 ，或怀疑细胞污染需要清除细菌 ，可以加入青霉素-链霉素双抗溶液 ，其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml ，链霉素为100ug/ml。
培养基生存：
将配置后的完全培养基2-8℃条件下 ，避光生存备用；或凭据使用需求分装入对应规格的PET/PETG方形试剂瓶[NEST]中。隔夜或1-2天后视察完全培养基 ，溶液澄清通透且无染菌 ，方可使用。
使用多余的血清 ，凭据剩余量 ，可分装入15mL/50mL的无菌离心管[NEST]中（避免血清冻存后膨胀泄露问题 ，离心管事情体积建议为80%） ，亦可分装入合适规格的PET/PETG方形试剂瓶[NEST]中 ，并用封口膜封口 ，-20℃条件下避光生存。
使用到的NEST产品：
15mL、50mL无菌离心管[NEST] PET/PETG方形试剂瓶[NEST]
杯式滤器(0.22μm PES膜) [NEST] 针式滤器 (0.22μm PES膜) [NEST]
