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GelNest? 基质胶
-常见问题与解析-
GelNest?基质胶是由小鼠肿瘤组织中提取的基底膜身分制备而成，包括的主要身分有层粘连卵白、IV型胶原卵白硫酸肝素糖卵白等。这些身分可以提供细胞黏附、剖析和增殖所需的支持和信号，同时也可以模拟生理情况中基底膜的特性，提高细胞培养的乐成率和效果。
常见Q&A
1.GelNest?高浓度基质胶用于哪些实验 ？
GelNest?高浓度基质胶可适用于体内应用研究，如高浓度卵白可增进肿瘤生长。高卵白浓度同时可使GelNest?基质胶注射入小鼠皮下后坚持完整，有利于注射的肿瘤细胞和/或血管生成因子的原位坚持，便于用于原位剖析和/或以后的切除。
2.GelNest?基质胶包装瓶的材质是什么 ？
GelNest?基质胶选用AccureVial?COP 瓶进行包装运输。环烯烃聚合物（COP）瓶作为中硼硅玻璃的替代品，具有极高的设计灵活性，其不易破碎的特点，也降低了物流运输本钱。
COP瓶优势：
★可耐受-196℃低温贮存；
★较玻璃材质而言不易破碎；
★低卵白吸附性；
★可耐受PH值>10的溶液，不易爆发脱片，对基质胶进行宁静性�；�。
3.如何将GelNest?基质胶用于3D培养 ？怎样制作3D胶 ？需要将细胞嵌入到GelNest?基质胶中吗 ？
GelNest?高浓度基质胶可适用于体内应用研究，如制备厚层包被用于3D细胞培养。细胞可以嵌在GelNest?基质胶中或者接种在GelNest?基质胶外貌（笼罩法）。
4.使用GelNest?基质胶时，移液器吸头和离心管需要预冷吗 ？
是的。因为GelNest?基质胶在高于10℃的条件下即会开始成胶，我们推荐操作基质胶时使用预冷的移液管、吸头和离心管。
5.GelNest?基质胶会快速聚合吗 ？
GelNest?基质胶在10℃至35℃时会快速聚合成胶。
6.什么情况下，需要使用无酚红GelNest?基质胶 ？
关于涉及颜色检测的实验，推荐使用无酚红GelNest?基质胶，如使用荧光染料或Drabkins法计数内皮细胞成管实验。关于子宫内膜细胞培养，也需使用无酚红GelNest?基质胶。
别的，酚红和非甾体雌激素结构类似，有类雌激素效应。在实验动物体内可能具有滋扰内排泄和荷尔蒙代谢的能力。
7.如何从GelNest?基质胶中收获细胞 ？
推荐使用中性卵白酶或细胞接纳解决计划来收获培养在GelNest?基质胶中的细胞。中性卵白酶相比胰酶、胶原酶或其他卵白水解酶能够更温和有效地获得单细胞悬液，不会损伤细胞或细胞外貌卵白。关于需要继续接种培养或进行检测的细胞，使用中性卵白酶不会爆发损伤。别的中性卵白酶也可以用于组织疏散。
关于代谢研究和RNA抽提，建议在4℃使用细胞接纳解决计划进行非酶反应的细胞收集。因为GelNest?基质胶中含有痕量的RNA，进行RNA剖析时，应设一个GelNest?基质胶（不接种细胞）的比照组。
其它从GelNest?基质胶中收获细胞的要领：降低温度至4℃-6℃使GelNest?基质胶解聚，需要一定的时间并且仅适合一部分应用。
8.GelNest?基质胶包被过的培养皿可以贮存多长时间呢 ？
包被过的培养皿最好当天使用，具体情况取决于实验目的。
需要生存的情况下，可在37°C培养箱中最多存放7天。生存时GelNest?基质胶外貌需要使用无血清培养基均匀笼罩，坚持湿润。
9.哪些情况下应该选用薄胶 ？什么时候用厚胶呢 ？3D培养有哪些应用 ？
薄胶主要用于辅助细胞贴壁，有利于细胞增殖。如原代细胞培养，需要一层薄薄的卵白层辅助，就可以选用薄胶。
厚胶主要用于3D细胞培养，如大鼠主动脉组织剖析为毛细血管样结构（RingAssay），以及进行细胞侵袭实验等。3D细胞培养实验，主要是用于研究细胞与细胞间的相互作用以及庞大结构，如生物组织等。
10.进行内皮管形成实验，应该选用多大浓度的GelNest?基质胶呢 ？
进行该实验，GelNest?基质胶最低浓度应不低于10mg/mL。
11.GelNest?基质胶的最低成胶浓度是几多 ？
差别的实验目的需要差别的GelNest?基质胶浓度，用户应该凭据具体的实验需求确定。
GelNest?基质胶最低成胶浓度为7mg/mL。稀释时不要简单进行体积倍比稀释，差别批次间的GelNest?基质胶浓度有差别，应该凭据最终事情浓度(mg/mL)算出需要加入的稀释液体（如PBS或无血清培养基）的量。
用于体内研究的GelNest?基质胶，为了制止成胶不完全，最终事情浓度不应低于10mg/mL。
12.GelNest?基质胶胶块在体内可以维持多长时间 ？
基质胶胶块可以在体内维持至少一周的时间。
13.怎样稀释GelNest?基质胶?
使用冰上预冷的无血清培养基或者PH=7.4的PBS。
14.应该如何对GelNest?基质胶移液操作?
推荐使用预冷的移液器或者注射器操作，移液管、枪头同样需要预冷。吸液时不要触及瓶子底部；分液时切忌过快、用力过猛。
如果使用移液管（Pipets），需要分液5mL时，应该吸取6mL，分液到移液管内仍有1mL时即停止；如果使用自动移液器（Pipetman），按压到第二档位吸液，然后按压到第一档位进行分液。
15.为什么我的GelNest?基质胶很粘稠 ？
基质胶的卵白浓度越高，胶体越粘稠。如果浓度高于13.0mg/mL，基质胶会显得很是厚重。
GelNest?基质胶产品在未稀释前都会比较粘稠。粘稠的高浓度GelNest?基质胶不稀释也可以直接使用，如用于培养肿瘤细胞和/或血管生成因子，注射于小鼠体内后，细胞可以坚持原位，便于原位剖析和/或以后的切除；或者稀释后，凭据标准浓度的GelNest?基质胶产品使用要领使用，具体稀释浓度凭据实验需求确定。
除因为产品自己浓度高而粘稠外，基质胶的状态还与运输历程中温度的变革和蕴藏条件有关。整个运输历程中必须使用干酷寒藏。如果蕴藏GelNest?基质胶的冰箱带有自动除霜功效，冰箱除霜历程中升温，可能使基质胶成胶。所以，切忌将GelNest?基质胶蕴藏于此类冰箱中。
为包管GelNest?基质胶的使用效果，冻融次数应该尽可能减少。拿到新的GelNest?基质胶后，请凭据单次用量进行分装。每次融化操作，GelNest?基质胶都应该安排于冰上。
16.为什么GelNest?基质胶在37°C成胶，而在4°C时却呈液体状态 ？
GelNest?基质胶是一种从小鼠肿瘤中提取的重组基底膜，新鲜提取的原料中主要包括以下身分：层粘连卵白，IV型胶原,巢卵白，基底膜聚糖、表皮生长因子、类胰岛素生长因子及其他生长因子。
这些卵白组成了GelNest?基质胶的基本结构。在22℃-37℃温度条件下，大分子间的共价键可以结合，促使GelNest?基质胶形成凝胶。而在低温条件（如4℃）下，由于没有足够的能量促使共价键结合，所以GelNest?基质胶泛起液体状态。
17.GelNest?基质胶可以重复冻融吗 ？
建议用户第一次融化后凭据单次用量进行分装，生存。
18.为什么细胞没有贴壁 ？GelNest?基质胶也脱落了 ？
首先需要检查细胞的接种浓度是否过高，GelNest?基质胶的用量应等同于细胞培养体系中培养基的用量。如果GelNest?基质胶被稀释到过低的浓度，形成的胶体容易从组织培养器皿外貌疏散。
19.未稀释的GelNest?基质胶中泛起的沉淀应该怎么样处理 ？
4℃下低速离心，去除沉淀物。
20.未使用完的GelNest?基质胶应该怎样生存的 ？
与细胞培养基或缓冲液混淆过但未使用完的GelNest?基质胶，不建议保存再用。
21.GelNest?基质胶可以贮保存-70℃吗 ？
是的。GelNest?基质胶可以贮保存-70℃。建议客户将整瓶的GelNest?基质胶进行分装，贮存于聚丙烯或其他可以耐受超低温条件材质的小管中，便当生存和使用。
22.GelNest?基质胶会有自发荧光吗 ？
GelNest?基质胶是一种卵白混淆物，所以GelNest?基质胶可能引发荧光的组分为卵白质身分。如果需要使用荧光检测细胞生长状态，建议使用者建立比照实验，在所需要的波长条件下进行比照，以便排除配景荧光。
23.使用GelNest?基质胶培养的细胞，如果需要进行切片或者免疫组织化学及免疫荧光检验，该怎样牢固呢 ？如何制止解聚 ？
可以使用2%浓度的多聚甲醛进行牢固。为制止牢固后泛起解聚的情况，可以加入1%浓度的戊二醛。戊二醛作为牢固剂，常用于电镜视察。
如果用户需要进行免疫荧光检验，加入戊二醛后，会泛起明显的配景荧光。为了解决这一问题，我们建议用户在牢固之后，使用NaBH4进行淬灭。NaBH4极易爆发气泡，进行该办法时，必须在水平操作台上小心操作，制止晃动，尽量减少气泡的形成。另外，用户也可以实验使用较低浓度的戊二醛进行牢固，如0.1%到0.5%，浓度越低，配景荧光信号越少。
24.为什么GelNest?的颜色纷歧样 ？
因为二氧化碳和碳酸氢盐缓冲液及酚红的反应，冷冻或刚融解的GelNest?都有可能泛起差别颜色，颜色从稻草黄到暗红色不等。
酚红在冷冻或者酸性情况下泛起明黄色，在接近生理pH值或0?C以上泛起红色。
GelNest?泛起颜色上的区别是正常情况，不会影响产品质量，并且在和5%的二氧化碳平衡后，会恢复到统一颜色。
选购指南
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