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2023-07-1815286 次浏览
使用指南 | 多层细胞培养瓶培养贴壁细胞

贴壁细胞的应用

贴壁细胞培养是生命科学领域中常见的实验技术之一 ,它可以应用于多种场景 ,包括但不但限于:

1.药物筛选:通过培养贴壁细胞 ,可以测试药物的疗效和毒性 ,从而筛选出具有治疗潜力的药物。

2.细胞学研究:贴壁细胞培养可以为细胞学研究提供许多有用的信息 ,例如细胞破裂、剖析和转化等

3.疾病模型:通过培养患者的贴壁细胞 ,可以建立与某些疾病相关的细胞模型 ,例如癌症。

4.基因编辑:贴壁细胞培养可以为基因编辑提供重要的支持 ,例如CRISPR-Cas9基因编辑技术。

总之 ,贴壁细胞培养一项很是重要的生命科学技术 ,可以应用于许多差别的场景和研究领域。


使用指南



接种细胞悬液

1.细胞悬液混匀:凭据实验要求的浓度准备细胞 ,在培养基瓶、培养瓶或其他容器中混匀。建议的事情容积为每层30-50 mL.

2.用移液管紧贴瓶壁缓慢地将液体加到五层细胞培养瓶中 ,制止爆发泡沫或者气泡(每次加液时移液管内液体可留少许)。

注意事项: 10 ml移液管可以伸到培养瓶底部使培养基疏散开 ,而25 mL移液管则只能伸到NEST标记的地方把液体疏散开。

3.把培养瓶有NEST标记那一侧朝向自己 ,顺时针做斜45度左右安排一段时间 ,使瓶中各个隔层的液体抵达平街。

4.轻缓地将培养瓶水平安排于事情台上 ,有NEST标记那一面朝上。

5.前后左右轻轻晃动多层瓶 ,液体会均匀地漫衍在五个生长面上。

注意事项:摇晃的行动要轻柔 ,一方面是避免起泡沫 ,另一方面是要避免培养基港漏到下层中。

移除培养液

 抽吸法 

抽吸的时候 ,将多层瓶做斜45度 ,有NEST标记的一面朝向自己。

将移液管伸究竟部抽吸培养基 ,直至完全抽吸完。

 倾倒法 

将有NEST标记的一面朝向自己 ,逆时针45度倾倒液体。

注意事项: 抽吸培养液时建议使用10 mL移液管 ,才华将培养液吸尽。

收集细胞

1.用缓冲液清洗一遍以去除残留的血清 ,后加入消化液 (> 5 mL层) ,混匀。

2.消化约莫2 min (视细胞情况而定) ,用消化终止液中和消化液

3.接纳移液管抽吸法或做倒法将细胞悬液置于离心管等容器中。

4.用一定量的缓冲液冲洗多层瓶三次 ,将冲洗液划分置于离心管中,混匀计数或者传代接种。


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